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    分子相互作用技術平臺

    更新時間:2019-04-08

    簡要描述:

    ForteBio公司的Octet分子 相互作用技術平臺包括儀器、生物傳感器和相應試劑盒,是一種免標記的,實時監測的先進技術,主要用于生物分子間相互作用動力學參數以及蛋白濃度的測定。

    Octet 分子相互作用技術平臺

    ForteBio公司的Octet分子 相互作用技術平臺包括儀器、生物傳感器和相應試劑盒,是一種免標記的,實時監測的先進技術,主要用于生物分子間相互作用動力學參數以及蛋白濃度的測定。該平臺通過浸試即讀的監測方式(Dip and ReadTM)來提高了檢測通量,簡單易學并有利于優化操作流程,使得用戶能在數分鐘內就可以獲得大量的可靠數據。在很多的應用領域中,這種技術平臺可以作為ELISA,HPLC以及SPR技術分析方法的有效替代手段。
     

    Octet系統的蛋白濃度定量和生物分子間相互作用動力學參數測定(Ka,Kd和KD),可以為早期研發過程提供重要的信息;同時,它的高通量優點可以大大節省研發的時間。它不僅可以運用于早期的研發和篩選以及晚期的臨床試驗,還可以用于生產監控和質量監控。正是因為Octet平臺不需要微流體控制系統,所以可以適用于粗樣品檢測;它的高通量特性使得其適用于抗體和化合物庫的篩選。

     

    BLI非標記檢測能跟蹤檢測溶液中分子與生物傳感器之間的結合,解離整個過程的變化。同一平臺,多種應用:
     

    一、Octet 分子相互作用技術平臺--在藥物開發過程中廣泛的應用

    基礎研究

    先導藥物的發現和優化

    過程控制

    生產和QC

    臨床前研究和臨床研究

    動力學參數測定

    雜交瘤動力學篩選

    克隆的選擇和排序

    生產量的監控

    檢疫治療的動力學評價

    相互作用機理研究

    噬菌體庫動力學篩選

    蛋白表達監控

    殘留物的測定

    抗藥抗體監控

    快速檢測方法的建立

    抗原標體測定

    過程優化

    產品批次比較

    藥代動力學研究

    小分子化合物的篩選

    配對抗體篩選

    生物活性評估

    生物活性測試

    生物標記物測定

     

    親和力排序

     

    穩定性測試

     

     

    蛋白質工程

     

     

     

     

    二、Octet 分子相互作用技術平臺--抗體和其他蛋白的定量

    Octet平臺可以對抗體和其他蛋白進行快速濃度測定,這使得該平臺可以用于表達庫的篩選、上游與下游的生產過程控制盒生物學治療中生物標記物的濃度定量測定。

    · 測定結果與HPLC有很好的可比性,精密度優于ELISA。

    · 15分鐘左右可以測定96個樣品的濃度

    · 直接測定的形式,不需要標記和其他試劑

    · 不需要繁瑣的純化工程,可以直接測定諸如培養上清等粗樣品

    · 可以提供定制服務,根據用戶需要制作特殊的生物傳感器


    三、Octet 分子相互作用技術平臺--更快更準的ELSA測定

    與ELISA相比,Octet平臺自動化程度高,測定的速度快,而且可以獲得更豐富更準確的數據,可以運用于藥代動力學和生物學治療中生物標記物的測定。

    · 高靈敏度的2步法和3步法測定

    · 測定條件可以在幾個小時內進行優化

    · 測試可以在3小時內結束,不要進行過夜包被

    · 全自動系統,不需要洗滌步驟,節省了時間并減少了人為誤差

    · 實時的相互作用數據比ELISA所用的終點判定法可以提供諸如解離常數等更多的信息。

    · 可以檢測到ELISA檢測不到的更弱的結合


    四、Octet 分子相互作用技術平臺--功能篩選及定性分析

    Octet系統提供了存在于粗樣品中的單抗和抗原間的快速的檢測方法。這樣可以為抗體藥物的篩選、過程優化以及疫苗的研發中盡早提供重要的信息,幫戰客戶盡早作出判斷。

    · Ka,Kd和K等動力學參數的研究

    · 親和力參數的測試范圍從mM到pM級別

    · 科技檢測血清或者細胞裂解上清等樣品

    · 抗原表位鑒定和配對抗體篩選-在6個小時內可以做34×34個反應

    · 可以同時測定8個(96孔板)或者16個樣品(96孔板或384孔板)

    · 可以測定膜蛋白和病毒顆粒的動力學參數

     

    五、Octet 分子相互作用技術平臺--小分子化合物和分子片段篩選

    Octet系統可以快速的檢測小分子化合物,實現從化學靶物到先導化合物(hit to lead)的檢測

    · 非標記檢測大于150Da化合物

    · 提供高質量的動力學參數,包括Ka,Kd以及穩態KD

    · 快速化合物庫篩選——8個小時內檢測1000個化合物

    · 不需要進行容積校正——Octet系統可以耐受高濃度的DMSO

    · 多功能的軟件使得數據分析更簡單,高通量的流程更簡潔

     

    Octet 分子相互作用技術平臺--技術優勢

    良好的性能——非??煽康?,高質量的數據

    · 免標記,實時監控

    · 具備HPLC的準確性

    · 比ELISA更好的精密度

    · 與SPR和ITC方法的檢測的結果*

    · 可以檢測粗樣品,比如高粘度的液體,低溶解度的分析物

     

    簡單——容易學習和操作

    · 2小時內就可以掌握

    · 全自動的操作平臺

    · 無需微流控系統,不需要專業的維護和操作人員

    · 眾多不同種類的生物傳感器可以滿足不同的需要

    · 直觀的操作和分析軟件

     

    快速——更快地知道結果,高通量

    · 對96個樣品進行濃度檢測只要15分鐘

    · 篩選1000種化合物在6個小時內完成

    · 多步法ELISA檢測在3個小時內完成

    · 96孔和384孔的加樣形式

    · 可以與自動化工作站兼容

     

    效率——高效的操作流程,便宜的成本

    · 在數小時內建立檢測方法

    · 粗樣品不需要純化,可以直接檢測

    · 寬泛的檢測范圍,樣品可以不用稀釋,增加準確性

    · 生物傳感器可以多次再生

    · 非破壞性樣品檢測,樣品可以回收利用

    · 樣品耗用量極低

     

    Octet家族——*的解決方案

    儀器種類和特性

     

    Octet RED384

    Octet QK384

    Octet RED96

    Octet QKe

    Analyte MW(Kinetics)

    >150D

    >5kD

    >150D

    >5kD

    Channels

    16

    16

    8

    8

    96-Well Format

    384-Well Format

    Minimum Assay Volume

    40ul

    40ul

    200ul

    200ul*

    Plate Positions

    2

    2

    1

    1

    Biosensor Re-racking

    Automation-Friendly

    *可以根據用戶需要將加樣體積減少至80-120uL

     

    BLI基本原理

    Octet系統所運用的生物膜干涉技術,是一種免標記技術,實時提供高通量的生物分子相互作用信息。該儀器發射白光到傳感器表面并收集反射光,不同頻率的反射光譜受到生物傳感器的光膜層厚度的影響,一些頻率的反射光形成了相長干涉(藍色),而另一些受到了相消干涉(紅色)。這些干涉被光譜儀所檢測到,并形成一幅干涉光譜,并以干涉光譜的相位位移強度(nm)顯示。因此,結合到傳感器表面的分子一旦有數量上的增減,光譜儀變會實時地檢測到干涉 光譜的位移,而這種位移直接反應出傳感器表面生物膜的厚度。

    生物膜干涉技術的優點

    · 可以獲取生物分子相互作用的高質量的數據

    · 直接作用的檢測方式,可免去標記和信號放大步驟

    · 實時監控可以對相互作用進行動力學分析

    · 良好的反應特異性,即使在粗樣品中

    · 適用于非常廣泛的不同物質分子

     

     

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